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无菌操作的主要设备接种箱和压力锅

 发表时间:2017-06-05 10:35:56 作者:世纪园林 浏览:

植物组织培养技术,尤其是快速养殖,并非只有专业人员和专业实验室才能够完成的。作为对多肉植物和组织培养有着浓厚兴趣的爱好者,在充分利用家庭条件的基础上,同样可以制备出自己的试管苗来的。在我们进行多肉植物的栽培中认识到,一些比较名贵的园艺品种,比如:万象、玉扇、寿、高纹鹰爪等十二卷属品种,还是缤纷橄榄、何鲁牵牛等块茎类植物,甚至于星球属、岩牡丹属等等,这些植物的常规养殖系数很低,他们都可以采用组织培养来解决其养殖问题,并且可以得到相当数量的幼苗。对于奇想天外等种子萌发困难的植物,同样可以借助组织培养来进行无菌播种。在进行组织培养过程中,不但可以对培养的植物有更深一层的认识,对常规的栽培有着相当大的意义。许多搞组织培养的专家,最初都不是专业学组培的,就是凭着兴趣和探索精神取得辉煌成绩的。关键是,爱好者有着浓厚的兴趣,非凡的观察力和细致入微的操作,这些都可以弥补非专业的缺陷,并且可以充分利用日常生活中的各种可利用资源,这些就足以让爱好者在家庭环境下完成组织培养了。同时这也不仅仅满足了自己的兴趣,还可以有一定的经济收益,甚至可以有所创新和发明。澳门贵宾会路线价格

接种箱和压力锅

    一、如何解决场地和基本设备:
    进行组织培养,没有一定的设备是无法开展的。正规实验室的组织培养设备是昂贵的,不适合家庭消费,但如果能有途径买到廉价的实验室设备,那就在好不过了。如果没有办法搞到实验室设备,就不妨动手自己制作一些简单的设备。
    1.无菌操作的主要设备——接种箱和压力锅:
    接种箱:植物组织培养的主题操作需要在一个相对密闭的无菌环境中进行。那么说我们首先要创造一个密闭的环境,可以利用一些木料、塑料板、有机玻璃、铝合金骨架等等廉价的材料,动手粘合一个小巧的接种箱。具体的参数可以找一本“食用菌栽培”的书籍,模仿种蘑菇的接种箱做一个即可。需要注意的是,组织培养的接种箱的密闭性要求比较高,尽量避免腐朽的木材和易生锈的材料,箱子的顶端按放两盏灯:20w的紫外线灯和20w的日光灯。箱体的周边尽量采用玻璃材料,因为这样便于观察,有时候接种箱还可以借用为培养箱,周边采用玻璃材料更方便于观察和培养。
    高压锅:主要用来对培养基和其他材料的灭菌。在实验室通常使用医用高压灭菌器,然而在家庭要充分利用厨房使用的高压锅,高压锅的压力要低于灭菌器,但是适当延长灭菌时间,还是可以取得较好的效果的。比如:对培养基灭菌40分钟就基本上可以达到灭菌效果(灭菌器是20分钟);无菌水采用间歇灭菌法,先用高压锅压40分钟,放置24小时,再压20分钟即可达到效果。
    2.场地:
    这个就因人而易了,总体的要求就是进行组织培养操作的地方要尽量无尘,减少空气流动,最好有一定的阳光。比如书房、写字间都可以用来进行无菌操作。
    进行培养基的配制可以借用一下厨房,但所使用的器具必须和厨具分开。一般说,组织培养中的几乎全部化学物质对人体是无害的,除了少数激素类物质和灭菌剂。对于有毒害的物质,需要认真保管,以免发生危险。
    3.辅助设备:
    主要指冰箱,它是用来储存化学物质和培养基的。天平,可以采用感量在100克的托盘天平,甚至用中药的药衡都可以代替。培养架,这个就更简单了,采用铝合金-玻璃的培养箱既可以满足要求,如果日光不足,可配合日光灯补光等。
    4.化学试剂:
    化学试剂是不可缺少的,因为组织培养的核心就是培养基的成分,而并不是简单的无菌操作。一些用量较大的化学物质是有必要买的,比如大量元素(硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙等)、高锰酸钾、甲醛、酒精、白砂糖、琼脂等等。微量元素和有机复合物不需要购买,因为它们的用量很小,我们可以用蔬菜浸汁或者马铃薯浸汁来代替。激素是必不可少的,他们的称量需要借助分析天平,但这是家庭条件所不允许的,如果有条件可以借助关系单位代替配成母液,每次取一些使用即可。最好的办法是到农资商店(卖农药化肥的地方),它们一般出售农业用的激素,有的是用安瓿装的,按照一定的比例加入到培养基当中即可。近几年来,有些化学品公司开始生产植物组织培养基原粉,只需要称取一定量加水即可,很方便。比如泛生化学品公司生产的ms原粉,只需要称量40克,加1升水,用微波炉加热5分钟即可分装,相当简便。
    消毒剂通常采用氯化汞(剧毒),如果不容易搞到,可以用漂白粉代替。调节酸碱度时,可以采用家庭常用的纯碱和白醋。
    5.培养容器和玻璃仪器:
    组织培养的容器要求并不高,只要玻璃颜色为透明色即可(钠玻璃不可以)。
    我们可以到垃圾站去看看,捡回一些废旧的果酱瓶就可以了。比较好用的是阿香婆辣酱瓶,我们实验室也是采用的这种瓶子。瓶子的封口膜采用聚丙烯塑料即可,如果不好找到,可以采用微波炉专用的锡箔纸甚至方便面的袋子,折叠成双层,用橡皮圈固定即可。
    其它玻璃仪器,比如烧杯、玻璃棒都可以用家庭的杯子和筷子代替;一些度量仪器,如量筒和移液管最好到玻璃仪器商店购买,恐怕花不了20元钱就可以配置一套相当棒的组培玻璃仪器。
    6.其它:
    还有一些用品是必需的。比如精密ph试纸(5.4~7.0),需要买一本,大约花1.5元即可搞定;酒精灯也不需要买,用墨水瓶配上一个玻璃环,再加上一个棉花芯,最后用农夫山泉矿泉水的瓶盖做灯冒,这样的酒精灯很小巧,适合接种箱使用。刀子剪子镊子是必需的,到花市的工具摊位上,花10元钱全部搞定,注意选比较小巧的工具。
    关于用水,按理说应该使用蒸馏水,但是我们家庭饮用的纯净水比蒸馏水还要纯,那么说借用一些饮用水就可以了。我们曾经采用康师傅纯净水进行动物细胞的培养,效果都是很不错的,更何况于植物细胞培养了。
    以上是组织培养的基本设备和试剂,主要突出了他们相关的替代品,因为作为组织培养中的快速养殖,它的要求是相当低的。我们的家庭培养和工厂化是不同的,工厂化生产组培苗要追求高增殖率,所以它的要求就比较精细和标准。我们的家庭培养则不需要那么准确,只要达到培养成功的目的即可。当然,如果想提高增殖倍率和试管苗的品质,必须尽量贴近实验室的用具和器材,代用品总是有一定的缺陷的。

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